| 產(chǎn)品名稱 |
人支氣管平滑肌細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-3530 |
| 組織來(lái)源 |
人支氣管組織，原代凍存 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞形態(tài) |
成纖維細(xì)胞樣 |
| 培養(yǎng)基 |
DMEM高糖培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等，建議購(gòu)買(mǎi)完全培養(yǎng)基 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
平滑肌即無(wú)紋肌的通稱，平滑肌是由長(zhǎng)紡錘形的單核細(xì)胞構(gòu)成。它不構(gòu)成獨(dú)立的器官，而只是成為構(gòu)成體壁和內(nèi)臟壁的因素（肌層）。平滑肌細(xì)胞互相連接，形成管狀結(jié)構(gòu)或中空器官；在功能上可以通過(guò)縮短和產(chǎn)生張力使器官發(fā)生運(yùn)動(dòng)和變形，也可產(chǎn)生連續(xù)收縮或緊張性收縮，使器官對(duì)抗所加負(fù)荷而保持原有的形狀。支氣管平滑肌細(xì)胞的收縮、舒張、增殖和凋亡與臨床許多疾病的病理生理過(guò)程有關(guān)．如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等。例如在哮喘發(fā)病時(shí)，可以檢測(cè)到氣管平滑肌發(fā)生數(shù)目的增生和肥大，表型也發(fā)生改變，由收縮型轉(zhuǎn)為合成型與分泌型，并分泌多種與細(xì)胞因子；而且出現(xiàn)向氣管腔遷移的跡象。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 主要功能 |
（1） 維持氣道張力維持支氣管形態(tài)。 （2） 氣道平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和調(diào)節(jié)機(jī)制是實(shí)現(xiàn)氣管正常生理功能的基礎(chǔ)。 （3） 體外培養(yǎng)中，氣道平滑肌細(xì)胞能表達(dá)CT－1，并釋放GM-CSF, RANTES 和IL-8。 |
| 主要病生理變化 |
（1） 支氣管炎。 （2） 支氣管哮喘。 （3） 支氣管擴(kuò)張。 |
