亚洲国产精品一区二区久久hs,精品国产一级在线观看,免 费 成人黄 色 大片,不卡中文一二三区,国产剧情麻豆mv在线观看,久久久久久久久久久精品,久久九九综合,久久久久久91香蕉国产

熱門搜索:A549    293T 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 AKK菌
購物車 1 種商品 - 共0元
當前位置: 首頁 > 行業(yè)資訊 > 小鼠肺上皮MLE-12細胞

小鼠肺上皮MLE-12細胞

 細胞特性

1 來源:小鼠肺

2 形態(tài):上皮細胞樣

3 含量:>1x106 /mL

4 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5 規(guī)格:T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝

運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后

立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80 度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生

長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

收到細胞后請拍照,3 天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。

細胞用途:僅供科研使用。

細胞接收后的處理:

1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),酒精消毒瓶壁并將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)

2-3h。

3T25 瓶中的培養(yǎng)基取出離心后,去上清,添加 6ml 新的完全培養(yǎng)基,重新加

入原 T25 培養(yǎng)瓶。

4)如果細胞長滿 90%請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用本公司附帶的完全培養(yǎng)

基。

細胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備 D/f12 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,2-5%;胰島素 0.005mg/ml, 雙抗,1%

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37 攝氏度。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細胞處理:

1 復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,離

心管加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 800-1000RPM 條件下離心 4-5 分鐘,棄去

上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入 T25 培養(yǎng)瓶中

培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至 6ml。

2 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 將上清取出,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培

養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部

分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基

終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出,和上清一起在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘,棄去上清

液,加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1

2 1:4 比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1細胞凍存時,取出上清,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓脫落

后,加入 1ml 完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

24min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加

入血清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度 1-2xE6/ml,每支凍存

管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍存管做好標識。

3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,至少 2 個小時以后轉(zhuǎn)入液

氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項:

1. 收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立

即與我們聯(lián)系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注

意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

丹巴县| 棋牌| 永康市| 达州市| 罗田县| 福建省| 荔浦县| 永清县| 栾城县| 南城县| 东山县| 巴楚县| 友谊县| 高雄县| 奈曼旗| 仪征市| 黄浦区| 石渠县| 即墨市| 南阳市| 荃湾区| 即墨市| 渭源县| 靖远县| 革吉县| 诸暨市| 聂拉木县| 恩平市| 鹿邑县| 辽阳市| 交口县| 翼城县| 肇庆市| 定陶县| 文山县| 当涂县| 瑞昌市| 镇康县| 轮台县| 伊金霍洛旗| 昌邑市|